Pengelolaan limbah medis merupakan upaya penting untuk mencegah pencemaran lingkungan, pencemaran penyakit serta, serta risiko kecelakaan kerja. Limbah medis yang tidak dikelola dengan baik dapat menimbulkan dampak negatif bagi kesehatan masyarakat maupun lingkungan sekitar. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan pengetahuan dan sikap dengan perilaku petugas kesehatan dalam pengelolaan limbah medis di Puskesmas Marusu Kabupaten Maros. Jenis penelitian ini adalah rancangan analitik dengan pendekatan cross-sectional. Sampel penelitian adalah seluruh petugas kesehatan yang berjumlah 95 responden, dipilih dengan teknik total sampling. Instrumen penelitian berupa kuesioner dengan skala Guttman dan Likert, dan data dianalisis menggunakan uji chi-square. Hasil penelitian menunjukkan adanya hubungan antara pengetahuan dengan perilaku petugas kesehatan menunjukkan nilai (X^2 = 14.150 ; p= 0.001) serta antara sikap dengan perilaku petugas kesehatan menunjukkan nilai ( X^2 = 20.352 ; p = 0.000 ) dalam pengelolaan limbah medis. Simpulan dari penelitian ini menunjukkan bahwa ada hubungan antara pengetahuan dan sikap dengan perilaku petugas kesehatan dalam pengelolaan limbah medis. Saran umtuk puskesmas adalah meningkatkan sarana prasarana dan pengawasan rutin, untuk petugas lebih disiplin melaksanakan SOP serta menyadari pentingnya pengelolaan limbah medis, Peneliti selanjutnya dapat mengkaji faktor-faktor lain seperti sarana prasarana, beban kerja, serta dukungan manajemen.